技術名稱 貽貝凝集素(RussiaSea-001)作為IgA腎病變之血清檢測試劑
計畫單位 國防醫學院
計畫主持人 陳安 醫師
技術簡介
IgA 腎病變(IgAN)為世界上常見之原發性腎絲球腎炎,但現今診斷 IgAN仍以臨床表徵及採取侵入性手術。在此,我們開發新穎之分析方法,利用凝集素 RussiaSea-001(來自海洋中淡菜之一種成份),針對 N-乙酰基-2-脫氧-2-氨基-半乳糖 (GalNAc/Gal) 具有特異之親和結合能力,成功研發出新穎之 Gd-IgA1偵測法。
1.利用RussiaSea-001結合ELISA分析IgA腎病變的血清
首先利用神經氨酸酶(neuraminidase)製備脫唾液酸化之免疫球蛋白A1 (Sd-IgA1)並進一步以β 半乳糖苷酶(β-galactosidase)製備Gd-IgA1。在此驗證了RussiaSea-001與半乳糖缺陷型IgA1(Gd-IgA1)有顯著的結合力(圖1),接著,我們從健康對照組與IgAN患者中選擇了10對血清樣品,後者以KM-55試劑組檢測出陽性且Gd-IgA1表現量高。如圖1所示,使用RussiaSea-001進行的ELISA在IgAN患者中顯示出高水平的Gd-IgA1。我們進一步確定了從IgAN患者中隨機收集的血清樣品中Gd-IgA1表現量(28個IgAN與22個正常對照)。 RussiaSea-001結合的ELISA再次顯示這些患者的Gd-IgA1顯著增加。
2.結合RussianSea-001親和層析和Western blot分析IgA腎病變患者血清
如圖2所示,此方法顯示IgAN患者中Gd-IgA1明顯較高。我們進一步確定了從IgAN患者中隨機收集血清樣品中Gd-IgA1的表現量(28個IgAN與22個正常對照)。該測定顯示這些患者的Gd-IgA1表現量顯著增加(圖2B-E)。
3.利用新穎修改型試管結合RussianSea-001分析IgA腎病變患者血清
我們從健康對照組與IgAN患者中選擇了10對血清樣品,後者以KM-55試劑組檢測出陽性且Gd-IgA1表現量高者。如圖3所示,新穎修改型RussiaSea-001試管分析在IgAN患者中顯示出高表現量的Gd-IgA1。我們進一步確定了從IgAN患者中隨機收集的血清樣本中的Gd-IgA1表現量(36個IgAN與31個正常對照)。這種穎修改型試管分析再次顯示這些患者的Gd-IgA1表現量顯著增加(圖3)。
科學突破性
我們發現貽貝中分離出來的RussiaSea-001凝集素,能與血清中缺乏半乳糖之IgA1(Galactose-deficient IgA1)強力結合,為對IgA腎病變具有高度潛能之候選檢測試劑,並完成專利保護之申請。(於今年6月3日通過國防醫學院正式專利申請案,已由專利公司進行申請作業)。
產業應用性
IgA腎病變是很常見的年輕族群的一種慢性腎臟病,因此本團隊建立之以異常醣基化之IgA1為標靶的檢驗診斷試劑(組),即可做為快速、精準篩選慢性腎臟病之診斷與醫療追蹤疾病之變化。
關鍵字 貽貝凝集素(RussiaSea-001) O-聯結半乳糖缺乏 管柱層析 改良式管柱分析
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  • 王羿程
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