本發明利用mFgg-ISX小鼠與Alb-Cre-p53loxp/loxp小鼠進行交配,產生子代的mFgg-ISX/Alb-Cre-p53loxp/loxp小鼠。該mFgg-ISX/Alb-Cre-p53loxp/loxp小鼠為一種肝特異性ISX基因表現且剔除p53基因轉殖鼠,且經實驗發現該mFgg-ISX/Alb-Cre-p53loxp/loxp小鼠因高熱量飲食攝取會快速誘發該小鼠體內的脂肪肝,進而導致肝慢性纖維化,最後發展成肝癌等肝臟疾病。此外,在該小鼠的肝臟疾病發展的同時,類似人類肝病相關之代謝性疾病亦伴隨產生。故該mFgg-ISX/Alb-Cre-p53loxp/loxp小鼠是一個透過高熱量飲食攝取誘發脂肪肝、肝慢性肝疾病及肝癌的動物模式。 肝特異性ISX基因轉殖小鼠係由國家實驗動物中心(台北,台灣)所獲得。該肝特異性ISX基因轉殖小鼠的製備方法包含:(1)將一小鼠胚胎,其經顯微注射入一mFgg啟動子(肝臟特異性啟動子)所驅動之ISX基因,轉殖到同品系母鼠中使該小鼠胚胎發育成鼠;以及(2)該些成鼠利用PCR分析篩選出帶有ISX基因之陽性小鼠,以得到該肝特異性ISX基因轉殖小鼠。或者是,該帶有ISX基因之陽性小鼠再與野生型同品系小鼠互相交配,以產出F0小鼠,再利用PCR方法篩選出帶有ISX基因之陽性F0鼠,同樣可以得到肝特異性ISX基因轉殖小鼠。上述所得的該肝特異性ISX基因轉殖小鼠可利用RT-PCR再次分析確認該肝特異性ISX基因轉殖小鼠的肝臟有特異性表現ISX基因。將肝特異性ISX基因轉殖小鼠(mFgg-ISX小鼠)與肝特異性p53基因剔除雄性小鼠(p53loxP/- ; Albcre)(Alb-Cre-p53loxp/loxp小鼠)雜交以產生所需的基因型。藉由標準基因分型技術(genotyping techniques)證實用於實驗的轉殖基因小鼠具有所需的基因型。 |